Tuesday, November 21, 2006

 

植物组织电镜

植物组织首先用4%左右的戊二醛固定约24小时,然后0.1M的磷酸缓冲液(PH7.2)冲洗,3次,每次20分钟。2%锇酸固定6小时,然后0.1M的 磷酸缓冲液(PH7.2)冲洗,6次,每次10分钟。然后从30%到100%乙醇脱水。然后纯乙醇:环氧丙烷从3/1,1/1,1/3,每步约20分钟。 纯粹的环氧丙烷3次,每次20分钟。环氧丙烷:树脂从3/1,1/1,1/3,每次4小时,后一步可过夜。最后纯树脂,4度,48小时。包埋聚合,45 度,12小时。最后一步,60度,聚合16小时。

植物样品的超薄切片制备技术与动物样品基本一致,所不同的是植物含有大量的液泡及空气泡,植物细胞有细胞壁等。因此,在预固定时,用真空泵抽气,选固定液 时,浓度要提高,戊二醛用5%,时间也要长一些。固定液的渗透压要高一些,渗透压可用一价的离子调节如:钠离子。葡萄糖和蔗糖也可。脱水及染色时间均较动 物同组织的为长。

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